lunes 14 de enero de 2013
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Incidencia de Nosema ceranae durante el invierno en colonias
de abejas melíferas retiradas de una forestación de Eucalyptus grandis
Mendoza, Y.1*, ; Díaz, S.1, ; Ramallo, G1, ; Invernizzi, C.2
Incidence of Nosema ceranae During Winter in Honey Bees
Colonies Removed from Eucaliptus grandis Plantations
Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012)
RESUMEN SUMMARY
CIENTÍFICO
Mendoza, Y.
1*
; Díaz, S.
1
; Ramallo, G1
; Invernizzi, C.
2
Incidencia de Nosema ceranae durante el invierno en colonias
de abejas melíferas retiradas de una forestación de
Eucalyptus grandis
La nosemosis es una enfermedad del sistema digestivo de las
abejas melíferas (Apis mellifera) causada por los microsporidios
Nosema apis y Nosema ceranae. En Uruguay solo ha sido detectado N. ceranae. La enfermedad se presenta indefectiblemente en las colonias que se trasladan a las forestaciones de
Eucalyptus grandis al final del verano y suele causar importantes pérdidas cuando las colonias permanecen allí durante el invierno. Los objetivos de este estudio fueron determinar cómo N.
ceranae afecta la invernada de las colonias que se retiran de las
plantaciones de E. grandis en otoño, y si la suplementación
proteica afecta el nivel de infección. En mayo se instalaron dos
apiarios en Salto y San José con colonias retiradas de una plantación de E. grandis. Las colonias recibieron uno de los siguientes tratamientos: 1) control de nosemosis, 2) suplementación
proteica, 3) control de nosemosis y suplementación proteica, y
4) sin control de nosemosis y sin suplementación proteica (testigo). En primavera se encontró en ambos apiarios que las colonias de los diferentes grupos no diferían en población y área de
cría. En el apiario de San José no se encontró diferencia en el
nivel de nosemosis entre las colonias con diferentes tratamientos, pero en el de Salto las colonias que no recibieron fumagilina
y con suplementación proteica estaban más infectadas que las
colonias tratadas con antibiótico y sin suplementación proteica. Este estudio muestra que N. ceranae no afecta a las colonias
durante la invernada y que la suplementación proteica puede
aumentar la infección.
Palabras clave: Apis mellifera, Nosemosis, parásitos, invernada
INTRODUCCIÓN
La nosemosis es una enfermedad que afecta las funciones digestivas de las abejas melíferas (Apis mellifera) causada por los
microsporidios Nosema apis y Nosema ceranae (Fries, 2010).
Durante más de un siglo se creyó que N. apis era la única especie
responsable de la nosemosis. Sin embargo, en el año 2005 Higes
y col. (2006) encontraron que N. ceranae, cuyo hospedero original es la abeja asiática Apis cerana (Fries y col., 1996), estaba
presente en España infectando a A. mellifera. Actualmente, N.
ceranae se halla ampliamente distribuido en el mundo (Klee y
col., 2007; Fries, 2010; Aurori y col., 2011). En Uruguay Invernizzi y col. (2009) encontraron únicamente a N. ceranae en
todas las regiones del país y confirmaron la presencia de esta
especie en una muestra de abejas colectada antes de 1990.
La presencia de N. ceranae, aparentemente más virulento que N.
apis (Higes y col., 2007; Martín-Hernández y col., 2007; Paxton y col., 2007; Higes y col., 2008; Higes y col., 2010), podría
ser una de las causas de las elevadas pérdidas de colonias ocurridas en los últimos años en Europa y Estados Unidos (Stokstad,
2007; van Engelsdorp y col., 2009; Neumann y Carreck, 2010;
Potts y col., 2010). Sin embargo, varios estudios han puesto en
duda la responsabilidad de N. ceranae en las pérdidas de colonias (Cox-Foster y col., 2007; Chen y col., 2008; Gómez Pajuelo y col., 2008; Invernizzi y col., 2009; Forsgren y Fries, 2010;
Williams y col., 2011; Traver y col., 2012).14 Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012)
Mendoza, Y. y col.
En Uruguay la nosemosis se presenta indefectiblemente en las
colonias que se trasladan a las plantaciones comerciales de Eucalyptus grandis durante el periodo de floración entre los meses
de febrero y mayo (Invernizzi y col., 2011a; Invernizzi y col.,
2011b). Los apicultores suelen reportar importantes pérdidas
de colmenas cuando los apiarios no pueden ser retirados al finalizar la floración y permanecen en las plantaciones durante el
invierno. Invernizzi y col. (2011b) corroboraron esta situación
encontrando que colonias libres de nosemosis trasladadas a una
forestación de E. grandis al comienzo de la floración presentaban al finalizar la misma un promedio de pecoreadoras infectadas de 90,8% y dos meses después constataron la pérdida del
39% de las colonias y un extremo debilitamiento de las restantes. Los autores adjudican a la nosemosis la elevada mortandad
de colonias registrada. También Mendoza y col. (2012) encontraron en una forestación de E. grandis que la infección por N.
ceranae incide en la mortandad y tamaño de las colonias durante
el invierno.
Según Fries (1995) la deficiencia de proteína es una de las causas que incrementa la nosemosis, especialmente cuando las abejas aprovechan flujos de néctar en otoño e invierno. En el estudio de Invernizzi y col. (2011b), realizado en una forestación de
E. grandis se constató, durante la primera mitad del periodo de
floración, que las colonias que disponían de reservas de polen
de variado origen botánico presentaban menor nivel de infectación por N. ceranae que las colonias que solo disponían del
polen de los eucaliptos. Sin embargo, Rinderer y Dell Elliott
(1977) y Porrini y col. (2011), trabajando en condiciones de
laboratorio con abejas confinadas en cajas hallaron que las abejas infectadas con Nosema spp. y alimentadas con polen se
infectaban más que las abejas que no disponían de polen.
Los objetivos de este estudio fueron determinar cómo N. ceranae afecta la invernada de colonias fuertemente infectadas retiradas de una plantación de E. grandis, y si la suplementación
proteica afecta el nivel de infectación de las abejas.
MATERIALES Y MÉTODOS
Dos apiarios de 114 y 76 colonias que entre marzo y mayo del
año 2010 permanecieron en una forestación de E. grandis en el
departamento de Rivera durante el periodo de floración, fueron
trasladados a fines de mayo a Salto y San José, respectivamente. Antes de retirar los apiarios las colonias recibieron un tratamiento acaricida para eliminar al ácaro Varroa destructor. Los
lugares donde se emplazaron los apiarios son áreas abiertas con
pequeños aportes de néctar y polen provenientes de diversas
fuentes florales. Estos sitios son similares a los que los apicultores utilizan en gran parte del país para emplazar los apiarios.
Una vez instalados los apiarios, el 16 de junio en San José y el
23 de junio en Salto, se registró el nivel de infección por N.
ceranae, la población de abejas, el área de cría, y las reservas de
miel y polen de las colonias. Para medir la infección se colectaron abejas pecoreadoras cuando regresaban a la colmena (tapando la piquera) y luego se maceraron conjuntamente los abdómenes de 60 abejas determinando el número promedio de esporas
por abeja con un hemocitómetro (Cantwell, 1970). La población de abejas se midió como el número de panales cubiertos
por abejas, mientras que el área de cría se estimó como cuartos
de cara de panal ocupados por huevos, larvas o pupas. La reserva de polen se evaluó como cuartos de cara de panal conteniendo polen ensilado y la de miel contando el número de panales
con miel. Todas las estimaciones se realizaron visualmente por
el mismo observador.
En cada apiario se formaron cuatro grupos homogéneos de colonias en cuanto a población, área de cría y reservas de alimento y
se aplicaron los siguientes tratamientos: 1) control de la nosemosis, 2) suplementación proteica, 3) control de la nosemosis y
suplementación proteica, y 4) sin control de la nosemosis y sin
suplementación proteica (testigo). En el apiario de Salto el
número de colonias asignado a cada uno de los tratamientos fue
de 30, 30, 28 y 26, respectivamente, mientras que en el apiario
de San José se asignaron 19 colonias a cada tratamiento.
Para controlar la nosemosis se suministró a cada colonia 200 mg
de fumagilina mezclados en 200 g de candi (mezcla de azúcar
impalpable y fructosa) en una sola aplicación (Gómez Pajuelo y
col. 2008). El producto comercial utilizado fue Nosemix del
laboratorio Kinter. Los tratamientos fueron realizados el 29 de
junio en el apiario San José y el 10 de julio en el de Salto.
La suplementación proteica de las colonias se hizo con dos
tortas de 150 g compuestas por 50% de levadura de cerveza,
30% de azúcar impalpable, 16,5% de fructosa y 3,5% de aceite
de girasol, siendo éstos los productos y las proporciones más
utilizadas por los apicultores para aportar proteínas a las colonias (Herbert, 1992). La primera torta de suplemento proteico
fue suministrada conjuntamente con la aplicación de fumagilina
y la segunda 20 días después.
La infección por N. ceranae, la población de abejas y el área de
cría de las colonias fue determinada el 27 de setiembre en el
apiario de Salto y el 5 de octubre en el apiario de San José.
La población de abejas, el área de cría y el nivel de nosemosis de
las colonias de los diferentes grupos en el mes de junio se compararon utilizando la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis
debido a que los datos no cumplían con los supuestos de la
estadística paramétrica. En primavera el nivel de nosemosis de
las colonias con diferentes tratamientos se comparó utilizando
un análisis de varianzas (ANOVA) luego de una transformación
logarítmica de los datos. Posteriormente se empleó el test de
Tukey para comparar las medias de los diferentes grupos. En
todos los casos se estableció un nivel de significación de 0,05.
Los cálculos se realizaron empleando el programa estadístico R
(R Development Core Team 2010).
RESULTADOS
Todas las colonias retiradas de la forestación de E. grandis y
llevadas a Salto y San José estaban infectadas con N. ceranae,
salvo tres colonias del apiario de San José en las que no se
encontraron esporas (Salto: 0,9 ± 0,6 millones esporas por
abeja, San José: 1,4 ± 0,9 millones esporas por abeja). En la
Figura 1 se muestra la distribución de colmenas en los apiarios
de Salto y San José según los millones de esporas por abeja
encontrados. El nivel de nosemosis, la población adulta, el área
de cría y las reservas de miel y polen de ambos apiarios se
muestran en el Cuadro 1.Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012) 15
CIENTÍFICO
Incidencia de Nosema ceranae en colonias de abejas melíferas
Tanto en el apiario de Salto como en el de San José, previo a la
aplicación de los tratamientos no hubieron diferencias estadísticas entre los cuatro grupos de colonias en el nivel de infección
por N. ceranae (Salto: Chi
2
= 4,613; P = 0,20; San José:
Chi
2
= 5,053; P = 0,17), la población de abejas (Salto:
Chi
2
= 0,888; P = 0,83; San José: Chi
2
= 0,692; P = 0,88) y el
área de cría (Salto: Chi
2
= 1,821; P = 0,61; San José: Chi
2
=
3,059; P = 0,38).
A lo largo del invierno se constató la pérdida de tres colonias en
el apiario de Salto (2,6%) y 7 en el de San José (9,2%). De las 10
colonias muertas, cinco habían recibido fumagilina y suplementación proteica, dos habían recibido fumagilina, una había recibido suplementación proteica y dos correspondían al grupo
control. Aunque el espaciamiento de las visitas a los apiarios no
permitió visualizar las causas de la muerte de las colonias, se
supone la pérdida de reinas fue la causas principal (las obreras
no pueden reemplazarla durante el invierno) ya que no se hallaron indicios de enfermedades de la cría o muerte por falta de
alimento.
Al comienzo de la primavera se estimó el nivel de infectación
por N. ceranae, la población adulta y el área de cría en las
colmenas de los dos apiarios. En ambos se registró un aumento
de la nosemosis pasando en el apiario de Salto de 1,4 ± 0,9 a 1,9
± 1,4 millones de esporas por abeja y en el apiario de San José
de 0,9 ± 0,6 a 3,4 ± 1,7 millones de esporas por abeja. En el
apiario de Salto se encontró diferencias entre en el nivel de
infestación de las colonias sometidas a los diferentes tratamientos (F = 4,19; P = 0,008) estando las colonias que no recibieron
fumagilina y con suplementación proteica más infectadas que
las colonias tratadas con antibiótico y sin suplementación proteica (P = 0,003). En cambio, en el apiario de San José las colonias de los diferentes grupos no se diferenciaron en el nivel de
infección (F = 0,71; P = 0,549) (Figura 2).
En primavera en ninguno de los apiarios se encontraron diferencias estadísticas entre las colonias de los diferentes grupos en la
población de abejas (Salto: Chi
2
= 2,262; P = 0,52; San José:
Chi
2
= 1,579; P = 0,66) y el área de cría (Salto: Chi
2
= 5,476;
P = 0,14; San José: Chi
2
= 3,380; P = 0,34) (Figura 3).
Cuadro 1. Esporas de N. ceranae por abeja, población de abejas, área de cría y reservas de polen y miel en las
colonias de los apiarios de Salto y San José en el mes de junio.
Apiario Fecha N Nosemosis Población Cría Polen Miel
Salto 23 junio 114 1,4 ± 0,9 8,2 ± 1,7 10,5 ± 5,0 4,6 ± 3,7 4,8 ± 2,0
San José 16 junio 76 0,9 ± 0,6 8,0 ± 2,3 14,1 ± 4,5 3,1 ± 2,6 6,1 ± 1,2
Figura 1. Distribución de las colonias de los apiarios de Salto y San José en el mes de junio según el grado
de infectación por N. ceranae.
Nosemosis: millones de esporas por abeja.
Población: panales cubiertos por abejas.
Cría: cuartos de cara de panal.
Polen: cuartos de cara de panal.
Miel: número de panales con miel.16 Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012)
Mendoza, Y. y col.
Figura 2. Infectación por N. ceranae en primavera en las colonias de los apiarios de Salto y San José
sometidas a diferentes tratamientos. CF/SP: colonias tratadas con fumagilina y sin
suplementación proteica; SF/CP: colonias sin tratamiento con fumagilina y con suplementación
proteica; CF/CP: colonias tratadas con fumagilina y con suplementación proteica; SF/SP:
colonias sin tratamiento con fumagilina y sin suplementación proteica.
Figura 3. Población de abejas y área de cría en primavera en las colonias de los apiarios de Salto y
San José sometidas a diferentes tratamientos. CF/SP: colonias tratadas con fumagilina y
sin suplementación proteica; SF/CP: colonias sin tratamiento con fumagilina y con
suplementación proteica; CF/CP: colonias tratadas con fumagilina y con suplementación
proteica; SF/SP: colonias sin tratamiento con fumagilina y sin suplementación proteica.Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012) 17
CIENTÍFICO
Incidencia de Nosema ceranae en colonias de abejas melíferas
DISCUSIÓN
Las colonias que se retiraron de las forestaciones de E. grandis
al terminar la floración, no sufrieron pérdidas relevantes y llegaron a la primavera en buenas condiciones, a pesar de estar fuertemente infectadas por N. ceranae. Este resultado fue independiente de si las colonias fueron tratadas con fumagilina o recibieron suplementación proteica. Incluso, sorprendentemente,
la nosemosis aumentó a lo largo del invierno, especialmente en
el apiario de San José. Esto demuestra que N. ceranae no afectaría la supervivencia y desarrollo de las colonias durante el
invierno si las colonias son retiradas de las forestaciones de E.
grandis al culminar a floración. Resultados análogos fueron los
obtenidos por Gómez Pajuelo y col. (2008), William y col.
(2011) y Traver y col. (2012) quienes en trabajos similares
hallaron que N. ceranae por sí sola, sin otros factores adversos
como pueden ser un estrés nutricional, la presencia de V. destructor o la intoxicación por agroquímicos, no tendría efecto
sobre las pérdida invernales y el desarrollo primaveral. Esta
situación es opuesta a la que ocurre en las colonias que permanecen en las forestaciones de E. grandis durante el invierno,
donde N. ceranae sería la responsable de las pérdidas de colonias (Invernizzi y col., 2011b; Mendoza y col., 2012).
En el apiario de San José las colonias tratadas con fumagilina
presentaron niveles de nosemosis similares a las colonias sin
tratamiento, mientras que en el de Salto solo las colonias que no
recibieron fumagilina y con suplementación proteica estaban
más infectadas que las colonias tratadas con antibiótico y sin
suplementación proteica. La aplicación de fumagilina utilizando candi como vehículo ha sido empleada con éxito por Gregorc
y Sulimanoviæ (1996) y Gómez Pajuelo y col. (2008), pero su
eficacia ha sido puesta en duda por Williams (1973) y Higes y
col. (2011). Este estudio no permitió determinar si la fumagilina
aplicada con candi es eficiente en el control de N. ceranae. En
primer lugar, el tiempo transcurrido desde la aplicación del antibiótico al análisis de las colonias fue de 79 días en el apiario de
Salto y de 98 días en el apiario de San José. En este tiempo las
colonias pudieron volver a reinfectarse, por ejemplo a partir de
la limpieza de excrementos con esporas. Por otro lado, el hecho
de que en cada apiario se dejaran juntas colonias curadas y no
curadas con fumagilina favorecería que las primeras tuviesen
contacto con las abejas infectadas de las segundas, por ejemplo
a través de simple deriva de las abejas entre colonias vecinas,
dificultando la eliminación de N. ceranae.
En el apiario de Salto las diferencias detectadas en el número de
esporas por abeja entre dos grupos de colonias pudieron deberse tanto al efecto de la fumagilina como del aporte de proteína.
En relación a la incidencia del consumo de proteína en el nivel de
nosemosis Rinderer y Dell Elliott (1977) y recientemente, Porrini y col. (2011), realizando pruebas de laboratorio observaron que las abejas infectadas con Nosema spp. y alimentadas
con polen presentaban más esporas que las abejas a las que no
se les suministró polen en la dieta. Sin embargo, Invernizzi y
col. (2011b) hallaron en una forestación de E. grandis que las
colonias que disponían de polen de diverso origen botánico estaban menos infectadas que las que disponían fundamentalmente de polen de los eucaliptos. Es posible que en colonias que
disponen de abundante polen la diversidad del origen botánico
juegue un rol relevante en la resistencia a la nosemosis. En este
sentido Alaux y col., (2010) encontraron que la diversidad botá-
nica del polen afecta la respuesta inmune de las abejas induciendo una mayor actividad de la glucosa oxidasa en comparación
con los pólenes monoflorales, aunque fueran ricos en proteína.
Sin embargo, no mejoran la expresión de otros componentes de
la respuesta humoral y celular implicados en la resistencia a la
nosemosis (Antúnez y col., 2009).
Finalmente, la fuerte incidencia de la nosemosis registrada al
comienzo de la primavera se ajusta a las descripciones sobre la
estacionalidad de la enfermedad. Así, Fries (1997) señala que N.
apis se presenta normalmente al final del invierno y principio
de primavera, aunque puede aparecer un pico en otoño. En cambio, Martín-Hernández y col. (2007) encuentran que la nosemosis en España, donde se encuentra a N. apis y N. ceranae, fue
perdiendo la estacionalidad. De todos modos, otro estudio reciente sobre la incidencia de N. ceranae a lo largo del año indica
que se mantiene la estacionalidad que históricamente presentó
N. apis (Traver y col., 2012).
En suma, este estudio muestra que N. ceranae no afecta a las
colonias con buena población y reservas de alimentos durante la
invernada en zonas con recursos nectaríferos y poliníferos limitados, pero suficientes para mantener la cría, y que la suplementación artificial con proteínas puede aumentar la infección
sin que se obtenga ningún otro beneficio.
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http://xa.yimg.com/kq/groups/10775939/579218894/name/20133007604.pdf
From: Juanse Barros
Incidencia de Nosema ceranae durante el invierno en colonias
de abejas melíferas retiradas de una forestación de Eucalyptus grandis
Mendoza, Y.1*, ; Díaz, S.1, ; Ramallo, G1, ; Invernizzi, C.2
Incidence of Nosema ceranae During Winter in Honey Bees
Colonies Removed from Eucaliptus grandis Plantations
Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012)
RESUMEN SUMMARY
CIENTÍFICO
Mendoza, Y.
1*
; Díaz, S.
1
; Ramallo, G1
; Invernizzi, C.
2
Incidencia de Nosema ceranae durante el invierno en colonias
de abejas melíferas retiradas de una forestación de
Eucalyptus grandis
La nosemosis es una enfermedad del sistema digestivo de las
abejas melíferas (Apis mellifera) causada por los microsporidios
Nosema apis y Nosema ceranae. En Uruguay solo ha sido detectado N. ceranae. La enfermedad se presenta indefectiblemente en las colonias que se trasladan a las forestaciones de
Eucalyptus grandis al final del verano y suele causar importantes pérdidas cuando las colonias permanecen allí durante el invierno. Los objetivos de este estudio fueron determinar cómo N.
ceranae afecta la invernada de las colonias que se retiran de las
plantaciones de E. grandis en otoño, y si la suplementación
proteica afecta el nivel de infección. En mayo se instalaron dos
apiarios en Salto y San José con colonias retiradas de una plantación de E. grandis. Las colonias recibieron uno de los siguientes tratamientos: 1) control de nosemosis, 2) suplementación
proteica, 3) control de nosemosis y suplementación proteica, y
4) sin control de nosemosis y sin suplementación proteica (testigo). En primavera se encontró en ambos apiarios que las colonias de los diferentes grupos no diferían en población y área de
cría. En el apiario de San José no se encontró diferencia en el
nivel de nosemosis entre las colonias con diferentes tratamientos, pero en el de Salto las colonias que no recibieron fumagilina
y con suplementación proteica estaban más infectadas que las
colonias tratadas con antibiótico y sin suplementación proteica. Este estudio muestra que N. ceranae no afecta a las colonias
durante la invernada y que la suplementación proteica puede
aumentar la infección.
Palabras clave: Apis mellifera, Nosemosis, parásitos, invernada
INTRODUCCIÓN
La nosemosis es una enfermedad que afecta las funciones digestivas de las abejas melíferas (Apis mellifera) causada por los
microsporidios Nosema apis y Nosema ceranae (Fries, 2010).
Durante más de un siglo se creyó que N. apis era la única especie
responsable de la nosemosis. Sin embargo, en el año 2005 Higes
y col. (2006) encontraron que N. ceranae, cuyo hospedero original es la abeja asiática Apis cerana (Fries y col., 1996), estaba
presente en España infectando a A. mellifera. Actualmente, N.
ceranae se halla ampliamente distribuido en el mundo (Klee y
col., 2007; Fries, 2010; Aurori y col., 2011). En Uruguay Invernizzi y col. (2009) encontraron únicamente a N. ceranae en
todas las regiones del país y confirmaron la presencia de esta
especie en una muestra de abejas colectada antes de 1990.
La presencia de N. ceranae, aparentemente más virulento que N.
apis (Higes y col., 2007; Martín-Hernández y col., 2007; Paxton y col., 2007; Higes y col., 2008; Higes y col., 2010), podría
ser una de las causas de las elevadas pérdidas de colonias ocurridas en los últimos años en Europa y Estados Unidos (Stokstad,
2007; van Engelsdorp y col., 2009; Neumann y Carreck, 2010;
Potts y col., 2010). Sin embargo, varios estudios han puesto en
duda la responsabilidad de N. ceranae en las pérdidas de colonias (Cox-Foster y col., 2007; Chen y col., 2008; Gómez Pajuelo y col., 2008; Invernizzi y col., 2009; Forsgren y Fries, 2010;
Williams y col., 2011; Traver y col., 2012).14 Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012)
Mendoza, Y. y col.
En Uruguay la nosemosis se presenta indefectiblemente en las
colonias que se trasladan a las plantaciones comerciales de Eucalyptus grandis durante el periodo de floración entre los meses
de febrero y mayo (Invernizzi y col., 2011a; Invernizzi y col.,
2011b). Los apicultores suelen reportar importantes pérdidas
de colmenas cuando los apiarios no pueden ser retirados al finalizar la floración y permanecen en las plantaciones durante el
invierno. Invernizzi y col. (2011b) corroboraron esta situación
encontrando que colonias libres de nosemosis trasladadas a una
forestación de E. grandis al comienzo de la floración presentaban al finalizar la misma un promedio de pecoreadoras infectadas de 90,8% y dos meses después constataron la pérdida del
39% de las colonias y un extremo debilitamiento de las restantes. Los autores adjudican a la nosemosis la elevada mortandad
de colonias registrada. También Mendoza y col. (2012) encontraron en una forestación de E. grandis que la infección por N.
ceranae incide en la mortandad y tamaño de las colonias durante
el invierno.
Según Fries (1995) la deficiencia de proteína es una de las causas que incrementa la nosemosis, especialmente cuando las abejas aprovechan flujos de néctar en otoño e invierno. En el estudio de Invernizzi y col. (2011b), realizado en una forestación de
E. grandis se constató, durante la primera mitad del periodo de
floración, que las colonias que disponían de reservas de polen
de variado origen botánico presentaban menor nivel de infectación por N. ceranae que las colonias que solo disponían del
polen de los eucaliptos. Sin embargo, Rinderer y Dell Elliott
(1977) y Porrini y col. (2011), trabajando en condiciones de
laboratorio con abejas confinadas en cajas hallaron que las abejas infectadas con Nosema spp. y alimentadas con polen se
infectaban más que las abejas que no disponían de polen.
Los objetivos de este estudio fueron determinar cómo N. ceranae afecta la invernada de colonias fuertemente infectadas retiradas de una plantación de E. grandis, y si la suplementación
proteica afecta el nivel de infectación de las abejas.
MATERIALES Y MÉTODOS
Dos apiarios de 114 y 76 colonias que entre marzo y mayo del
año 2010 permanecieron en una forestación de E. grandis en el
departamento de Rivera durante el periodo de floración, fueron
trasladados a fines de mayo a Salto y San José, respectivamente. Antes de retirar los apiarios las colonias recibieron un tratamiento acaricida para eliminar al ácaro Varroa destructor. Los
lugares donde se emplazaron los apiarios son áreas abiertas con
pequeños aportes de néctar y polen provenientes de diversas
fuentes florales. Estos sitios son similares a los que los apicultores utilizan en gran parte del país para emplazar los apiarios.
Una vez instalados los apiarios, el 16 de junio en San José y el
23 de junio en Salto, se registró el nivel de infección por N.
ceranae, la población de abejas, el área de cría, y las reservas de
miel y polen de las colonias. Para medir la infección se colectaron abejas pecoreadoras cuando regresaban a la colmena (tapando la piquera) y luego se maceraron conjuntamente los abdómenes de 60 abejas determinando el número promedio de esporas
por abeja con un hemocitómetro (Cantwell, 1970). La población de abejas se midió como el número de panales cubiertos
por abejas, mientras que el área de cría se estimó como cuartos
de cara de panal ocupados por huevos, larvas o pupas. La reserva de polen se evaluó como cuartos de cara de panal conteniendo polen ensilado y la de miel contando el número de panales
con miel. Todas las estimaciones se realizaron visualmente por
el mismo observador.
En cada apiario se formaron cuatro grupos homogéneos de colonias en cuanto a población, área de cría y reservas de alimento y
se aplicaron los siguientes tratamientos: 1) control de la nosemosis, 2) suplementación proteica, 3) control de la nosemosis y
suplementación proteica, y 4) sin control de la nosemosis y sin
suplementación proteica (testigo). En el apiario de Salto el
número de colonias asignado a cada uno de los tratamientos fue
de 30, 30, 28 y 26, respectivamente, mientras que en el apiario
de San José se asignaron 19 colonias a cada tratamiento.
Para controlar la nosemosis se suministró a cada colonia 200 mg
de fumagilina mezclados en 200 g de candi (mezcla de azúcar
impalpable y fructosa) en una sola aplicación (Gómez Pajuelo y
col. 2008). El producto comercial utilizado fue Nosemix del
laboratorio Kinter. Los tratamientos fueron realizados el 29 de
junio en el apiario San José y el 10 de julio en el de Salto.
La suplementación proteica de las colonias se hizo con dos
tortas de 150 g compuestas por 50% de levadura de cerveza,
30% de azúcar impalpable, 16,5% de fructosa y 3,5% de aceite
de girasol, siendo éstos los productos y las proporciones más
utilizadas por los apicultores para aportar proteínas a las colonias (Herbert, 1992). La primera torta de suplemento proteico
fue suministrada conjuntamente con la aplicación de fumagilina
y la segunda 20 días después.
La infección por N. ceranae, la población de abejas y el área de
cría de las colonias fue determinada el 27 de setiembre en el
apiario de Salto y el 5 de octubre en el apiario de San José.
La población de abejas, el área de cría y el nivel de nosemosis de
las colonias de los diferentes grupos en el mes de junio se compararon utilizando la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis
debido a que los datos no cumplían con los supuestos de la
estadística paramétrica. En primavera el nivel de nosemosis de
las colonias con diferentes tratamientos se comparó utilizando
un análisis de varianzas (ANOVA) luego de una transformación
logarítmica de los datos. Posteriormente se empleó el test de
Tukey para comparar las medias de los diferentes grupos. En
todos los casos se estableció un nivel de significación de 0,05.
Los cálculos se realizaron empleando el programa estadístico R
(R Development Core Team 2010).
RESULTADOS
Todas las colonias retiradas de la forestación de E. grandis y
llevadas a Salto y San José estaban infectadas con N. ceranae,
salvo tres colonias del apiario de San José en las que no se
encontraron esporas (Salto: 0,9 ± 0,6 millones esporas por
abeja, San José: 1,4 ± 0,9 millones esporas por abeja). En la
Figura 1 se muestra la distribución de colmenas en los apiarios
de Salto y San José según los millones de esporas por abeja
encontrados. El nivel de nosemosis, la población adulta, el área
de cría y las reservas de miel y polen de ambos apiarios se
muestran en el Cuadro 1.Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012) 15
CIENTÍFICO
Incidencia de Nosema ceranae en colonias de abejas melíferas
Tanto en el apiario de Salto como en el de San José, previo a la
aplicación de los tratamientos no hubieron diferencias estadísticas entre los cuatro grupos de colonias en el nivel de infección
por N. ceranae (Salto: Chi
2
= 4,613; P = 0,20; San José:
Chi
2
= 5,053; P = 0,17), la población de abejas (Salto:
Chi
2
= 0,888; P = 0,83; San José: Chi
2
= 0,692; P = 0,88) y el
área de cría (Salto: Chi
2
= 1,821; P = 0,61; San José: Chi
2
=
3,059; P = 0,38).
A lo largo del invierno se constató la pérdida de tres colonias en
el apiario de Salto (2,6%) y 7 en el de San José (9,2%). De las 10
colonias muertas, cinco habían recibido fumagilina y suplementación proteica, dos habían recibido fumagilina, una había recibido suplementación proteica y dos correspondían al grupo
control. Aunque el espaciamiento de las visitas a los apiarios no
permitió visualizar las causas de la muerte de las colonias, se
supone la pérdida de reinas fue la causas principal (las obreras
no pueden reemplazarla durante el invierno) ya que no se hallaron indicios de enfermedades de la cría o muerte por falta de
alimento.
Al comienzo de la primavera se estimó el nivel de infectación
por N. ceranae, la población adulta y el área de cría en las
colmenas de los dos apiarios. En ambos se registró un aumento
de la nosemosis pasando en el apiario de Salto de 1,4 ± 0,9 a 1,9
± 1,4 millones de esporas por abeja y en el apiario de San José
de 0,9 ± 0,6 a 3,4 ± 1,7 millones de esporas por abeja. En el
apiario de Salto se encontró diferencias entre en el nivel de
infestación de las colonias sometidas a los diferentes tratamientos (F = 4,19; P = 0,008) estando las colonias que no recibieron
fumagilina y con suplementación proteica más infectadas que
las colonias tratadas con antibiótico y sin suplementación proteica (P = 0,003). En cambio, en el apiario de San José las colonias de los diferentes grupos no se diferenciaron en el nivel de
infección (F = 0,71; P = 0,549) (Figura 2).
En primavera en ninguno de los apiarios se encontraron diferencias estadísticas entre las colonias de los diferentes grupos en la
población de abejas (Salto: Chi
2
= 2,262; P = 0,52; San José:
Chi
2
= 1,579; P = 0,66) y el área de cría (Salto: Chi
2
= 5,476;
P = 0,14; San José: Chi
2
= 3,380; P = 0,34) (Figura 3).
Cuadro 1. Esporas de N. ceranae por abeja, población de abejas, área de cría y reservas de polen y miel en las
colonias de los apiarios de Salto y San José en el mes de junio.
Apiario Fecha N Nosemosis Población Cría Polen Miel
Salto 23 junio 114 1,4 ± 0,9 8,2 ± 1,7 10,5 ± 5,0 4,6 ± 3,7 4,8 ± 2,0
San José 16 junio 76 0,9 ± 0,6 8,0 ± 2,3 14,1 ± 4,5 3,1 ± 2,6 6,1 ± 1,2
Figura 1. Distribución de las colonias de los apiarios de Salto y San José en el mes de junio según el grado
de infectación por N. ceranae.
Nosemosis: millones de esporas por abeja.
Población: panales cubiertos por abejas.
Cría: cuartos de cara de panal.
Polen: cuartos de cara de panal.
Miel: número de panales con miel.16 Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012)
Mendoza, Y. y col.
Figura 2. Infectación por N. ceranae en primavera en las colonias de los apiarios de Salto y San José
sometidas a diferentes tratamientos. CF/SP: colonias tratadas con fumagilina y sin
suplementación proteica; SF/CP: colonias sin tratamiento con fumagilina y con suplementación
proteica; CF/CP: colonias tratadas con fumagilina y con suplementación proteica; SF/SP:
colonias sin tratamiento con fumagilina y sin suplementación proteica.
Figura 3. Población de abejas y área de cría en primavera en las colonias de los apiarios de Salto y
San José sometidas a diferentes tratamientos. CF/SP: colonias tratadas con fumagilina y
sin suplementación proteica; SF/CP: colonias sin tratamiento con fumagilina y con
suplementación proteica; CF/CP: colonias tratadas con fumagilina y con suplementación
proteica; SF/SP: colonias sin tratamiento con fumagilina y sin suplementación proteica.Veterinaria (Montevideo) 48 (188) 13-19 (2012) 17
CIENTÍFICO
Incidencia de Nosema ceranae en colonias de abejas melíferas
DISCUSIÓN
Las colonias que se retiraron de las forestaciones de E. grandis
al terminar la floración, no sufrieron pérdidas relevantes y llegaron a la primavera en buenas condiciones, a pesar de estar fuertemente infectadas por N. ceranae. Este resultado fue independiente de si las colonias fueron tratadas con fumagilina o recibieron suplementación proteica. Incluso, sorprendentemente,
la nosemosis aumentó a lo largo del invierno, especialmente en
el apiario de San José. Esto demuestra que N. ceranae no afectaría la supervivencia y desarrollo de las colonias durante el
invierno si las colonias son retiradas de las forestaciones de E.
grandis al culminar a floración. Resultados análogos fueron los
obtenidos por Gómez Pajuelo y col. (2008), William y col.
(2011) y Traver y col. (2012) quienes en trabajos similares
hallaron que N. ceranae por sí sola, sin otros factores adversos
como pueden ser un estrés nutricional, la presencia de V. destructor o la intoxicación por agroquímicos, no tendría efecto
sobre las pérdida invernales y el desarrollo primaveral. Esta
situación es opuesta a la que ocurre en las colonias que permanecen en las forestaciones de E. grandis durante el invierno,
donde N. ceranae sería la responsable de las pérdidas de colonias (Invernizzi y col., 2011b; Mendoza y col., 2012).
En el apiario de San José las colonias tratadas con fumagilina
presentaron niveles de nosemosis similares a las colonias sin
tratamiento, mientras que en el de Salto solo las colonias que no
recibieron fumagilina y con suplementación proteica estaban
más infectadas que las colonias tratadas con antibiótico y sin
suplementación proteica. La aplicación de fumagilina utilizando candi como vehículo ha sido empleada con éxito por Gregorc
y Sulimanoviæ (1996) y Gómez Pajuelo y col. (2008), pero su
eficacia ha sido puesta en duda por Williams (1973) y Higes y
col. (2011). Este estudio no permitió determinar si la fumagilina
aplicada con candi es eficiente en el control de N. ceranae. En
primer lugar, el tiempo transcurrido desde la aplicación del antibiótico al análisis de las colonias fue de 79 días en el apiario de
Salto y de 98 días en el apiario de San José. En este tiempo las
colonias pudieron volver a reinfectarse, por ejemplo a partir de
la limpieza de excrementos con esporas. Por otro lado, el hecho
de que en cada apiario se dejaran juntas colonias curadas y no
curadas con fumagilina favorecería que las primeras tuviesen
contacto con las abejas infectadas de las segundas, por ejemplo
a través de simple deriva de las abejas entre colonias vecinas,
dificultando la eliminación de N. ceranae.
En el apiario de Salto las diferencias detectadas en el número de
esporas por abeja entre dos grupos de colonias pudieron deberse tanto al efecto de la fumagilina como del aporte de proteína.
En relación a la incidencia del consumo de proteína en el nivel de
nosemosis Rinderer y Dell Elliott (1977) y recientemente, Porrini y col. (2011), realizando pruebas de laboratorio observaron que las abejas infectadas con Nosema spp. y alimentadas
con polen presentaban más esporas que las abejas a las que no
se les suministró polen en la dieta. Sin embargo, Invernizzi y
col. (2011b) hallaron en una forestación de E. grandis que las
colonias que disponían de polen de diverso origen botánico estaban menos infectadas que las que disponían fundamentalmente de polen de los eucaliptos. Es posible que en colonias que
disponen de abundante polen la diversidad del origen botánico
juegue un rol relevante en la resistencia a la nosemosis. En este
sentido Alaux y col., (2010) encontraron que la diversidad botá-
nica del polen afecta la respuesta inmune de las abejas induciendo una mayor actividad de la glucosa oxidasa en comparación
con los pólenes monoflorales, aunque fueran ricos en proteína.
Sin embargo, no mejoran la expresión de otros componentes de
la respuesta humoral y celular implicados en la resistencia a la
nosemosis (Antúnez y col., 2009).
Finalmente, la fuerte incidencia de la nosemosis registrada al
comienzo de la primavera se ajusta a las descripciones sobre la
estacionalidad de la enfermedad. Así, Fries (1997) señala que N.
apis se presenta normalmente al final del invierno y principio
de primavera, aunque puede aparecer un pico en otoño. En cambio, Martín-Hernández y col. (2007) encuentran que la nosemosis en España, donde se encuentra a N. apis y N. ceranae, fue
perdiendo la estacionalidad. De todos modos, otro estudio reciente sobre la incidencia de N. ceranae a lo largo del año indica
que se mantiene la estacionalidad que históricamente presentó
N. apis (Traver y col., 2012).
En suma, este estudio muestra que N. ceranae no afecta a las
colonias con buena población y reservas de alimentos durante la
invernada en zonas con recursos nectaríferos y poliníferos limitados, pero suficientes para mantener la cría, y que la suplementación artificial con proteínas puede aumentar la infección
sin que se obtenga ningún otro beneficio.
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